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澳门百家乐玩法 > 工程技术论文 > 一般工业技术 > 发酵乳中乳酸菌计数不确定度的评定

发酵乳中乳酸菌计数不确定度的评定

2018-07-27 10:33:38 字体:   打印 收藏 

摘 要:目的:对发酵乳中乳酸菌计数不确定度的来源进行分析。方法:本文依据GB4789.35-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验乳酸菌检验》进行测定,根据JJF1056.1-2012《测量不确定度评定与表示》与SN/T4091-2015/ISO/TS19036:-2006《食品微生物学测量不确定度评估指南》对不确定度来源进行分析和评定。结果:乳酸菌计数过程中发散是引起不确定度的主因,同一样品重复测定结果的扩展不确定度为0.051 5(p=95%,%,k=2.26),一组样品重复测定结果的扩展不确定度为0.070 9(p=95%,k=2.23)。结论:合理选择评定方法,采用合并样本标准差的方法来评定乳酸菌检验的不确定度。

关键词:发酵乳;乳酸菌计数;不确定度

 乳酸菌是-一类可发酵糖主要产生大量乳酸的细菌的通称[1]。GB19320-2010中规定发酵乳产品中的乳酸菌数不得低于1×106 CFU/g((mL)),乳酸菌的含量是评价产品对于人们营养与健康作用的重要指标[2],因而测量结果的可用性值得高度关注。一切定量结果都不可避免具有不确定度,测量不确定度是根据所用到的信息,表征赋予被测量量值分散性的非负参数。目前,GB/T27025-2008《检测和校准实验室能力的通用要求》(ISO/IEC17025-2005《检测和校准实验室能力认可准则》)[3,-4]指出:适当时,要对测量结果的不确定度进行评定。CNAS-CL09:-  2013《检测和校准实验室能力认可准则在微生物检测领域的应用说明》中也指出:在微生物检测领域,某些情况下,应对测量不确定度进行合理的评估[5]。《实验室资质认定评审准则》中对不确定度也有要求: :当不确定度影响到对结果符合性的判定时,报告中还需要包括不确定度的信息。本研究依据最新版GB4789.35-2016[1]《食品安全国家标准食品微生物学检验乳酸菌检验》[1]的规定对发酵乳中乳酸菌总数进行测定。为保证数据的准确可靠,可根据JJF1056.1   -2012《测量不确定度评定与表示》与SN/T4091-2015/ISO/TS19036:-2006《食品微生物学测量不确定度评估指南》[6,-7]中有关规定对乳酸菌总数进行不确定度分析,找出乳酸菌检测过程中的关键控制点[8],为验证实验室对微生物的检测、计数的准确度和精密度方面的能力提供理论参考。   1 材料与方法   1.1 样品、仪器与培养基   样品为:市售酸奶;。   仪器:生化培养箱(型号:BSP-250),冰箱,均质器,无菌均质袋,立式自动压力蒸汽灭菌器(GR850DF,致微仪器有限公司),厌氧袋,天平,无菌试管,无菌吸管,生理盐水;。   培养基:MRS培养基,MC培养基。   1.2 检测方法   1.2.1 取样与稀释:   样品的全部制备过程均应尊循遵循无菌操作程序。称取酸奶样品25 g于装225 mL   生理盐水的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1min~2 min制成1:∶10的样品匀液。用1 mL无菌吸管吸取1:∶10的样品匀液1 mL,沿管壁缓慢注于装有9 mL生理盐水的无菌试管中,制成1:∶100的样品匀液,按上述操作顺序,做10倍递增样品匀液,每递增稀释一次,即换用1次1 mL灭菌吸管。   1.2.2 稀释倍数选择:   根据平常实验经验,酸奶中乳酸菌计数(GB4789.35-2010版标准)一般选择10-5、10-6稀释度,根据GB4789.35-2016版标准,本实验选择10-6、10-7、10-8三 3个稀释度。   1.2.3 倾注平板、培养与计数:   将冷却至48 ℃的MRS琼脂培养基倾注入有稀释液的平皿中,转动平皿混匀。(36℃±1)℃ 厌氧培养(72h±2)h。培养后计数平板上的所有菌落数。   2 结果与分析   2.1 结果报告原则   选取菌落数在30-~300 CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。,单位以CFU/mL表示。   2.2 建立数学模型   由于只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内,因此计算该稀释度平板上的菌落数乘以该稀释度,即为乳酸菌计数结果,公式为:   (1)   式(1)中:N——为样品中菌落数; X——为平板上的菌落数; d——为稀释度。   2.3 不确定度的来源   检测中不确定度的来源主要有:样品本身的均匀性、取样的重复性、操作者、培养时间、设备、培养基、试剂及玻璃量具等。与一般的侧量比较,微生物同一样品重复测量的结果相差极大,即结果的分散性较大。随机效应带来的样本重复性偏差是获取测量不确定度的主要因素,即A类评定。本实验主要采用A类评定测量不确定度,同时考虑了B类不确定度对合成不确定度的贡献。   2.4 不确定度的评定   2.4.1同一样品的重复测量结果的不确定度评定[9-12]   依据GB 4789.35-2016《食品微生物学检验 乳酸菌检验》进行检验,,在重复性条件下对同一个酸奶样品进行了10次独立性测试,由于乳酸菌的数量分布在108和109数量级,计算出的样本标准差很大,因此对实验数据取对数后进行计算[9-12],结果和中间计算值,见表1。   表1 1 重复测量结果和中间计算值表   Table 1 Evaluation results of the repeat measurement of fermented milk   序号测量结果X/(CFU/mL)[a2] 残差平方和取值区间   logX((dB))X((108))   11 140 000 0009.0570.0390.001 58.966 59.069 59.312   21 020 000 0009.009-0.0090.000 1   3980 000 0008.991-0.0270.000 7   4960 000 0008.982-0.0360.001 3   51 220 000 0009

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期刊简介:

《现代食品》杂志是经国家新闻出版总署正式批准办刊的国家级刊物,由中粮工程科技有限公司主管,中粮工程科技(郑州)有限公司主办,并由现代食品杂志社编辑出版的综合性食品方面的学术性期刊。国内统一刊号:CN 41-1434/TS,全国公开发行。更多>>

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